Identification of the taxonomic status of Scinax nebulosus and Scinax constrictus (Scinaxinae, Anura) based on molecular markers / Identificação do status taxonômico de Scinax nebulosus e Scinax constrictus (Scinaxinae, Anura), baseado em marcadores moleculares

Abstract The validation of many anuran species is based on a strictly descriptive, morphological analysis of a small number of specimens with a limited geographic distribution. The Scinax Wagler, 1830 genus is a controversial group with many doubtful taxa and taxonomic uncertainties, due a high number of cryptic species. One example is the pair of species Scinax constrictus and Scinax nebulosus, which share a similar morphology. Scinax constrictus is restricted to the Brazilian Cerrado savanna, while S. nebulosus is widely distributed throughout northern South America. Despite the validation of many anuran species, discriminations based only on morphological traits is quite difficult due to the high conservative morphology of some groups. In this context, the present study uses mitochondrial and nuclear genes to provide a more consistent diagnosis and test the validity of S. constrictus as a distinct species from S. nebulosus, as well as evaluate the position of these taxa within the Scinax genus. The topologies obtained herein uphold the monophyletic status of Scinax based on all molecular markers assessed in this study, in all analytical approaches, with high levels of statistical support.

Resumo A validação de muitas espécies de anuros é baseada em uma análise morfológica e descritiva de um pequeno número de espécimes com uma distribuição geográfica limitada. O gênero Scinax Wagler, 1830 é um grupo controverso com muitos táxons duvidosos e incertezas taxonômicas devido ao grande número de espécies crípticas. Um exemplo são as espécies, Scinax constrictus e Scinax nebulosus, que compartilham uma morfologia similar. Scinax constrictus é restrito à savana do Cerrado brasileiro, enquanto S. nebulosus é amplamente distribuído pelo norte da América do Sul. Apesar da validação de muitas espécies de anuros, a discriminação baseada apenas em características morfológicas é bastante difícil, devido à alta morfologia conservadora de alguns grupos. Neste contexto, o presente estudo utiliza genes mitocondriais e nucleares para fornecer um diagnóstico mais consistente e para testar a validade de S. constrictus como uma espécie distinta de S. nebulosus, bem como avaliar a posição destes táxons dentro do gênero Scinax. As topologias obtidas confirmaram o status monofilético de Scinax com base em todos os marcadores moleculares, em todas as abordagens analíticas, com altos níveis de suporte estatístico.

Identification of the taxonomic status of Scinax nebulosus and Scinax constrictus (Scinaxinae, Anura) based on molecular markers

Abstract The validation of many anuran species is based on a strictly descriptive, morphological analysis of a small number of specimens with a limited geographic distribution. The Scinax Wagler, 1830 genus is a controversial group with many doubtful taxa and taxonomic uncertainties, due a high number of cryptic species. One example is the pair of species Scinax constrictus and Scinax nebulosus, which share a similar morphology. Scinax constrictus is restricted to the Brazilian Cerrado savanna, while S. nebulosus is widely distributed throughout northern South America. Despite the validation of many anuran species, discriminations based only on morphological traits is quite difficult due to the high conservative morphology of some groups. In this context, the present study uses mitochondrial and nuclear genes to provide a more consistent diagnosis and test the validity of S. constrictus as a distinct species from S. nebulosus, as well as evaluate the position of these taxa within the Scinax genus. The topologies obtained herein uphold the monophyletic status of Scinax based on all molecular markers assessed in this study, in all analytical approaches, with high levels of statistical support.

Resumo A validação de muitas espécies de anuros é baseada em uma análise morfológica e descritiva de um pequeno número de espécimes com uma distribuição geográfica limitada. O gênero Scinax Wagler, 1830 é um grupo controverso com muitos táxons duvidosos e incertezas taxonômicas devido ao grande número de espécies crípticas. Um exemplo são as espécies, Scinax constrictus e Scinax nebulosus, que compartilham uma morfologia similar. Scinax constrictus é restrito à savana do Cerrado brasileiro, enquanto S. nebulosus é amplamente distribuído pelo norte da América do Sul. Apesar da validação de muitas espécies de anuros, a discriminação baseada apenas em características morfológicas é bastante difícil, devido à alta morfologia conservadora de alguns grupos. Neste contexto, o presente estudo utiliza genes mitocondriais e nucleares para fornecer um diagnóstico mais consistente e para testar a validade de S. constrictus como uma espécie distinta de S. nebulosus, bem como avaliar a posição destes táxons dentro do gênero Scinax. As topologias obtidas confirmaram o status monofilético de Scinax com base em todos os marcadores moleculares, em todas as abordagens analíticas, com altos níveis de suporte estatístico.

Impact of acute undernutrition on growth, ileal morphology and nutrient transport in a murine model

Undernutrition represents a major public health challenge for middle- and low-income countries. This study aimed to evaluate whether a multideficient Northeast Brazil regional basic diet (RBD) induces acute morphological and functional changes in the ileum of mice. Swiss mice (∼25 g) were allocated into two groups: i) control mice were fed a standard diet and II) undernourished mice were fed the RBD. After 7 days, mice were killed and the ileum collected for evaluation of electrophysiological parameters (Ussing chambers), transcription (RT-qPCR) and protein expression (western blotting) of intestinal transporters and tight junctions. Body weight gain was significantly decreased in the undernourished group, which also showed decreased crypt depth but no alterations in villus height. Electrophysiology measurements showed a reduced basal short circuit current (Isc) in the undernourished group, with no differences in transepithelial resistance. Specific substrate-evoked Isc related to affinity and efficacy (glutamine and alanyl-glutamine) were not different between groups, except for the maximum Isc (efficacy) induced by glucose. Transcription of Sglt1 and Pept1 was significantly higher in the undernourished group, while SN-2 transcription was decreased. No changes were found in transcription of CAT-1 and CFTR, while claudin-2 and occludin transcriptions were significantly increased in the undernourished group. Despite mRNA changes, SGLT-1, PEPT-1, claudin-2 and occludin protein expression showed no difference between groups. These results demonstrate early effects of the RBD on mice, which include reduced body weight and crypt depth in the absence of significant alterations to villus morphology, intestinal transporters and tight junction expression.

Genetic differentiation in the populations of red piranha, Pygocentrus nattereri Kner (1860) (Characiformes: Serrasalminae), from the river basins of northeastern Brazil / Diferenciação genética em populações da piranha vermelha, Pygocentrus nattereri Kner (1860) (Characiformes: Serrasalminae), em bacias hidrográficas do nordeste do Brasil

Abstract The red piranha, Pygocentrus nattereri, is an important resource for artisanal and commercial fisheries. The present study determines the genetic differentiation among P. nattereri populations from the northeastern Brazilian state of Maranhão. The DNA was isolated using a standard phenol-chloroform protocol and the Control Region was amplified by PCR. The PCR products were sequenced using the didesoxyterminal method. A sequence of 1039 bps was obtained from the Control Region of 60 specimens, which presented 33 polymorphic sites, 41 haplotypes, һ =0.978 and π =0.009. The neutrality tests (D and Fs) were significant (P < 0.05) for most of the populations analyzed. The AMOVA indicated that most of the molecular variation (72%) arises between groups. The fixation index was highly significant (FST = 0.707, P < 0.00001). The phylogenetic analyses indicated that the specimens represented a monophyletic group. Genetic distances between populations varied from 0.8% to 1.9%, and were <0.5% within populations. The degree of genetic differentiation found among the stocks of P. nattereri indicates the need for the development of independent management plans for the different river basins in order to preserve the genetic variability of their populations.

Resumo A piranha vermelha, Pygocentrus nattereri, é um recurso importante para pesca artesanal e comercial. O presente estudo determinou a diferenciação genética entre populações de P. nattereri no nordeste do estado brasileiro do Maranhão. O DNA foi isolado utilizando o protocolo de Fenol-clorofórmio e a Região Controle foi amplificada por PCR. Os produtos da PCR foram sequenciados usando o método didesoxiterminal. Uma sequência de 1039 pbs foi obtida da Região Controle de 60 espécimes, que apresentaram 33 sítios polimórficos, 41 haplótipos, һ= 0.978 e π= 0.009. Os testes de neutralidade (D and Fs) foram significativos (P < 0.05) para a maioria das populações analisadas. A AMOVA indicou que a maior parte da variação molecular (72%) surge entre os grupos. O índice de fixação foi altamente significativo (FST = 0.707, P = < 0.00001). As análises filogenéticas indicaram que os espécimes representam um grupo monofilético. Distâncias genéticas entre as populações variaram de 0.8% a 1.9%, e de <0.5% dentro das populações. O grau de diferenciação genética encontrada entre os estoques de P. nattereri indicam a necessidade para o desenvolvimento de planos de manejo independentes para as diferentes bacias hidrográficas, a fim de preservar a variabilidade genética dessas populações.

Pollen analysis of honey and pollen collected by Apis mellifera linnaeus, 1758 (Hymenoptera, Apidae), in a mixed environment of Eucalyptus plantation and native cerrado in Southeastern Brazil / Espectro polínico do alimento coletado por Apis mellifera linnaeus, 1758 (hymenoptera, apidae), em ambiente contendo plantações de Eucalyptus e cerrado nativo no sudeste brasileiro

Abstract Eucalyptus plantations are frequently used for the establishment of bee yards. This study was carried on at Fazenda Brejão, northwestern region of the State of Minas Gerais, Brazil. This farm is covered both with native Cerrado vegetation (Brazilian savanna) and eucalyptus plantations. This paper reports on the botanic origin of pollen pellets and honey collected from honeybee (Apis mellifera) hives along a thirteen-month period (January 2004 to January 2005). The most frequent pollen types found in the pollen pellets during the rainy season were Trema micrantha (Ulmaceae), Copaifera langsdorffii (Fabaceae), an unidentified Poaceae, unidentified Asteraceae-2, Cecropia sp. 1 (Cecropiaceae) and Eucalyptus spp. (Myrtaceae); during the dry season the most frequent pollen types were Acosmium dasycarpum (Fabaceae), Cecropia sp. 1 (Cecropiaceae) and Eucalyptus spp. (Myrtaceae). Pollen grains of Baccharis sp. (Asteraceae), Cecropia sp. 1 (Cecropiaceae), Copaifera langsdorffii (Fabaceae), Mimosa nuda (Fabaceae), Eucalyptus spp. (Myrtaceae) and Trema micrantha (Ulmaceae) were present in the honey samples throughout the study period.

Resumo Plantações de Eucalyptus são, frequentemente, utilizadas como locais de instalação para colmeias. Este estudo foi realizado na Fazenda Brejão, localizada no noroeste de Minas Gerais, Brasil. Esta fazenda é coberta por Cerrado nativo (savana brasileira) e por plantações de eucaliptos. Este trabalho indica a origem botânica de bolotas e mel coletados em colmeias de Apis mellifera por um período de 13 meses (Janeiro/2004 a janeiro/2005). Os tipos polínicos mais frequentes nas amostras de pólen durante a estação chuvosa foram Trema micrantha (Ulmaceae), Copaifera langsdorffii (Fabaceae), Poaceae, Asteraceae não identificada 2, Cecropia sp. 1 (Cecropiaceae) e Eucalyptus spp. (Myrtaceae); na estação seca, os tipos polínicos mais frequentes foram Acosmium dasycarpum (Fabaceae), Cecropia sp. 1 (Cecropiaceae) e Eucalyptus spp. (Myrtaceae). As espécies Baccharis sp. (Asteraceae), Cecropia sp. 1 (Cecropiaceae), Copaifera langsdorffii (Fabaceae), Mimosa nuda (Fabaceae), Eucalyptus spp. (Myrtaceae) e Trema micrantha (Ulmaceae) estiveram presentes durante todo o período amostrado.

Population analysis of Scomberomorus cavalla (Cuvier, 1829) (Perciformes, Scombridae) from the Northern and Northeastern coast of Brazil

Scomberomorus cavalla is a pelagic fish species widely distributed on the Atlantic west coast, and a noticeable decrease in its capture level in the USA and Gulf of Mexico is occurring, compared to the levels reached by the species in the past. Likewise, in some areas of Brazil, there has been indication of over-harvesting. However, there are no molecular studies focusing on the management of such an important item. Thus, in the present study, 380 nucleotide base pairs of the mitochondrial DNA D-Loop region of samples from Macapá, Bragança, and Fortaleza were sequenced. Phylogenetic and population analyses revealed that there is only one panmitic population, and low levels of genetic variability were verified. These results, as well as the noticed over-harvesting of S. cavalla, represent very important data to determine the management of such stock in order to prevent a collapse or the risk of future extinction.

Scomberomorus cavalla é uma espécie de peixe pelágico amplamente distribuído na costa oeste do Atlântico, e uma diminuição no seu nível de captura tem sido verificada nos E.U.A e Golfo do México, comparada com os níveis alcançados pela espécie no passado. Da mesma forma, em algumas áreas do Brasil, há indícios de sobre-exploração. Entretanto, não existem estudos moleculares que visam o manejo deste importante item. Desta forma, no presente estudo, foram seqüenciados 380 pares de bases nucleotídicas da região da Alça-D do DNA mitocondrial de amostras provenientes de desembarque em Macapá, Bragança e Fortaleza. As análises filogenéticas e populacionais revelaram que há apenas uma população panmítica e baixos níveis de variabilidade genética foram observados. Estes resultados, assim como a observada sobre-exploração de S. cavala, representam dados muito importantes para o estabelecimento do manejo deste estoque a fim de prevenir um colapso ou risco de extinção no futuro.

Population analysis of Scomberomorus cavalla (Cuvier, 1829) (Perciformes, Scombridae) from the Northern and Northeastern coast of Brazil

Scomberomorus cavalla is a pelagic fish species widely distributed on the Atlantic west coast, and a noticeable decrease in its capture level in the USA and Gulf of Mexico is occurring, compared to the levels reached by the species in the past. Likewise, in some areas of Brazil, there has been indication of over-harvesting. However, there are no molecular studies focusing on the management of such an important item. Thus, in the present study, 380 nucleotide base pairs of the mitochondrial DNA D-Loop region of samples from Macapá, Bragança, and Fortaleza were sequenced. Phylogenetic and population analyses revealed that there is only one panmitic population, and low levels of genetic variability were verified. These results, as well as the noticed over-harvesting of S. cavalla, represent very important data to determine the management of such stock in order to prevent a collapse or the risk of future extinction.

Scomberomorus cavalla é uma espécie de peixe pelágico amplamente distribuído na costa oeste do Atlântico, e uma diminuição no seu nível de captura tem sido verificada nos E.U.A e Golfo do México, comparada com os níveis alcançados pela espécie no passado. Da mesma forma, em algumas áreas do Brasil, há indícios de sobre-exploração. Entretanto, não existem estudos moleculares que visam o manejo deste importante item. Desta forma, no presente estudo, foram seqüenciados 380 pares de bases nucleotídicas da região da Alça-D do DNA mitocondrial de amostras provenientes de desembarque em Macapá, Bragança e Fortaleza. As análises filogenéticas e populacionais revelaram que há apenas uma população panmítica e baixos níveis de variabilidade genética foram observados. Estes resultados, assim como a observada sobre-exploração de S. cavala, representam dados muito importantes para o estabelecimento do manejo deste estoque a fim de prevenir um colapso ou risco de extinção no futuro.

Concentrações séricas de retinol de éguas gestantes em haras do Vale do Rio Doce e Sul de Minas Gerais / Retinol serum concentration in pregnant mares in farms of Vale do Rio Doce and Sul de Minas Gerais, Brazil

Foram analisadas as concentrações séricas de retinol de 16 éguas gestantes em haras de duas diferentes regiões de Minas Gerais (Vale do Rio Doce e Sul de Minas). Os animais foram mantidos em pastagens com sal mineral à vontade, sem qualquer suplementação concentrada. Amostras de sangue foram coletadas a cada 30 dias, nos meses de maio a novembro de 2002, objetivando verificar a necessidade de suplementação das éguas com vitamina A nos meses de seca. A concentração de betacaroteno das pastagens também foi correlacionada com as concentrações sorológicas de vitamina A, a fim de verificar a utilização da reserva hepática dessa vitamina pelos eqüinos. As análises do retinol sorológico e do betacaroteno das pastagens foram realizadas por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). O experimento foi em parcelas subdivididas, no delineamento inteiramente ao acaso, e os resultados foram comparados pelo teste Duncan. A correlação entre as concentrações séricas de retinol e betacaroteno das pastagens foi estimada pelo método de Pearson. Os resultados demonstraram que, no ano de 2002, não houve necessidade de suplementação das éguas dos haras das regiões estudadas nos meses de seca e que não houve correlação entre os teores de retinol plasmático das éguas com os de betacaroteno das pastagens.

Retinol serum concentrations were analyzed from 16 pregnant mares raised in farms of two different regions of Minas Gerais state, Brazil (Vale do Rio Doce and Sul de Minas). The animals were maintained on pasture with free access to mineral supplement without grain concentrate supplementation. Blood samples were collected monthly from May to November 2002, aiming to verify the need of vitamin A supplementation during the dry season. The concentration of beta-carotene from pasture samples was also correlated with blood plasma concentration to verify the utilization of hepatic stock of vitamin A. High performance liquid chromatography (HPLC) was used to determine vitamin A and beta-carotene concentrations. The used statistics was the split plot design and the results were compared by Duncan test. The Pearson correlation between the serum concentration of retinol and beta-carotene from pasture was estimated. The results demonstrated that the supplementation of pregnant mares in farms of the studied regions was not necessary during the dry season and that no significant correlation between the serum concentration of retinol and beta-carotene from pasture was observed.

Influência das pontas excessivas de esmalte dentário na digestibilidade e nutrientes de dietas de eqüinos / Influence of excessive enamel points on nutrients digestibility in diets of horses

Para avaliar a influência das pontas excessivas de esmalte dentário na digestibilidade dos nutrientes de dietas de eqüinos, utilizaram-se 13 animais alimentados com capim-elefante (Pennisetum purpureum) e ração comercial. Foram analisadas matéria seca, proteína bruta, energia bruta, fibra em detergente neutro, fibra em detergente ácido, hemicelulose e celulose nas fezes antes e duas semanas após o desgaste corretivo das pontas excessivas de esmalte. A digestibilidade aumentou (P<0,001) em todas as variáveis estudadas após o desgaste corretivo.

The influence of excessive enamel points on structural carbohydrates digestibility in horses was evaluated. Thirteen horses were fed on elephant grass (Pennisetum purpureum) and concentrate. Dry matter, crude protein, gross energy, neutral detergent fiber, acid detergent fiber, hemicellulose and cellulose were measured in the feces before and two weeks after floating of the excessive enamel points. The apparent digestibility of all nutrients was increased (P<0.001) after the treatment.

Composicão química dos cascos de eqüinos das racas Pantaneira e Mangalarga Marchador / Chemical composition of black versus non-pigmented hooves from Pantaneira and Mangalarga Marchador horses

Pesquisaram-se eventuais diferencas na composicão da matéria seca (MS), proteína bruta, extrato etéreo, cinzas, cálcio, fósforo, cobre, zinco, perfil de aminoácidos e biotina entre cascos pretos e claros, de eqüinos das racas Pantaneira e Mangalarga Marchador, criados na região do Pantanal, MS, e no município de Caeté, MG, respectivamente. De cada raca foram coletadas amostras de 10 éguas vazias, não lactantes, com idade entre 5 e 10 anos, sendo que, em um mesmo animal, foram retiradas amostras das duas coloracões de casco nas regiões da pinca, ombro, quarto e talão. Na raca Pantaneira, os cascos claros apresentaram maior teor de fósforo que os pretos, e os demais elementos avaliados não foram diferentes segundo a cor. Na Mangalarga Marchador, não houve diferenca entre os cascos claros e pretos, quanto a todas as características estudadas.

Tamanho da leitegada e pesos médios, ao nascer e aos 21 dias de idade, de leitões da raça Large White / Litter size and average weights at birth and at 21 days of age of Large White piglets

Avaliaram-se os efeitos da época de parto e idade da matriz ao parto (IMP) sobre o tamanho da leitegada (TL), da época de parto, idade da matriz ao parto e tamanho da leitegada sobre o peso médio ao nascer (PMN), e da época de parto, idade da matriz ao parto, número de nascidos vivos (NV) e percentual de machos na leitegada (PERCM) sobre o peso aos 21 dias de idade (PM21) de leitões Large White. Utilizaram-se dados de 3259 leitões nascidos no período de junho/85 a junho/96. A avaliação foi feita por meio de regressão múltipla. Para TL apenas o efeito de IMP determinou modificações significativas sobre o número de leitões nascidos. TL médio foi 9,73 mais ou menos 2,78, observando-se maiores leitegadas em fêmeas de 2,84 a 3,83 anos. PMN e PM21 foram 1,35kg mais ou menos 0,18 e 5,06kg mais ou menos 1,00, respectivamente. Para PMN foram significativos os efeitos de IMP e TL, com redução do peso em 20g para cada leitão adicional. Para PM21 apenas o número de NV apresentou efeito significativo.

Descarte e congelabilidade do sêmen de touros de raças zebuínas e taurinas em central de inseminação artificial no Brasil / Semen discarded and freezing ability of Zebu and European bulls from a Brazilian artificial insemination centre

Foram analisadas as características do sêmen obtido de 250 touros de raças zebuínas e 144 touros de raças taurinas em uma central de inseminação artificial, no Sudeste brasileiro. Consideraram-se dois períodos de colheita: chuvoso e seco, ambos com temperaturas elevadas (>19,0º C). Também foram estudadas as causas dos descartes e a congelabilidade do sêmen. O sêmen das raças taurinas foi superior ao das raças zebuínas nos aspectos turbilhonamento, motilidade e concentração espermática e inferior quanto ao volume (P<0,05). O descarte foi maior na estação chuvosa (P<0,05). O sêmen descartado por características físicas foi maior nas raças zebuínas e por características morfológicas nas raças taurinas (P<0,05). A congelabilidade do sêmen das raças taurinas foi superior à dos touros das raças zebuínas (P<0,05).

Degradabilidade in situ da matéria seca de forrageiras tropicais obtidas em diferentes épocas de corte / In situ dry matter degradation of tropical forages harvested at different ages

Estimou-se a degradabilidade in situ de 10 forrageiras tropicais em três idades ao corte (21, 42 e 63 dias) e em três tempos de incubação (6, 24 e 96h). As forrageiras utilizadas foram: Andropogon gayanus cv. Planaltina, Brachiaria brizantha (acessos 3401, 3413 e 3451 CPAC), Cenchrus ciliaris (acessos 79119, 79146, 79148, 80199 e 81302 CPATSA) e Panicum maximum (3616 CPAC). Os acessos de B. brizantha, P. maximum e A. gayanus apresentaram os maiores valores de degradabilidade da matéria seca e os de C. ciliaris os valores mais baixos. Todas as forrageiras apresentaram queda no desaparecimento da matéria seca com o avanço da idade. Os acessos de Brachiaria brizantha 3413 e 3451 apresentaram as maiores degradabilidades efetivas.

Efeito da suplementação e do intervalo de pastejo sobre a qualidade da forragem e consumo voluntário de vacas Holandês I Zebu em lactação em pastagem de capim-elefante / Effect of supplementation and resting period on forage quality and voluntary intake of elephantgrass grazed by lactating Holstein I Zebu cows

O trabalho foi realizado entre fevereiro e setembro, com o objetivo de avaliar a qualidade e o consumo de forragem de capim-elefante manejado sob pastejo rotativo, com período de ocupação dos piquetes de três dias e variação do intervalo de pastejo de: 30 dias (com e sem o uso de concentrado ao longo do ano) e 36 e 45 dias (sem o uso de concentrado). Foram usadas 24 vacas Holandês I Zebu em lactação. De fevereiro a maio o pasto foi o único volumoso. De junho a setembro, as vacas receberam cana mais 1 por cento de uréia. A composição química de extrusas de capim-elefante foi, de modo geral, semelhante (P>0,05) entre intervalos de pastejo (6,1 a 18,2 por cento para PB; 63,5 a 81,4 por cento para FDN; 32,7 a 47,6 por cento para FDA e 43,7 a 72,9 por cento para digestibilidade in vitro da MS). Houve decréscimo no teor de PB do capim-elefante e aumento nos de FDN e FDA para cada dia adicional de ocupação do piquete (P<0,0001). Na estação chuvosa, o consumo diário de capim-elefante foi, de modo geral, semelhante (P>0,05) nos diferentes intervalos de pastejo, variando de 1,7 a 3,6 por centoPV para MS e de 1,1 a 2,7 por centoPV para FDN. Na estação seca, nas pastagens sem concentrado, o consumo de MS do capim-elefante variou de 0,39 a 2,2 por centoPV e sua contribuição no consumo total da dieta decresceu de 52 por cento no primeiro para 43 por cento no terceiro dia de ocupação do piquete. O consumo suplementar de cana mais uréia foi efetivo em minimizar a redução no consumo total de MS.

Determination of the minimal representative number of microscopic fields to quantify apoptosis in canine lymph nodes

Determinou-se o número mínimo de campos por lâmina para se ter uma amostragem representativa para o estudo de apoptose em linfonodos de cães com cinomose. Um linfonodo traqueobrônquico de cão foi colhido e processado segundo técnica para inclusão em parafina. Secções de 5æm foram coradas pelo tricrômico de Shorr. Utilizou-se um analisador de imagens para registrar o número de células em apoptose e os índices apoptóticos de 300 campos, na mesma lâmina. Obtiveram-se, então, valores médios para 10 amostras de 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 e 50 campos ao acaso. Realizou-se o estudo dos desvios-padrão das médias (DP) em relação ao tamanho da amostra que os originou. Quando as oscilações de DP entre amostras consecutivas foram menores que 5 por cento, o ganho em representatividade produzido pelo acréscimo no número de campos não se justificou, dispensando amostragens maiores. Desse modo, a análise de 40 campos por lâmina, na pesquisa de índices apoptóticos em linfonodos caninos, é suficientemente representativa, uma vez que apresenta instabilidade aceitável.

Efeito da suplementação e do intervalo de pastejo sobre a qualidade da forragem e consumo voluntário de vacas Holandês × Zebu em lactação em pastagem de capim-elefante / Effect of supplementation and resting period on forage quality and voluntary intake of elephantgrass grazed by lactating Holstein × Zebu cows

O trabalho foi realizado entre fevereiro e setembro, com o objetivo de avaliar a qualidade e o consumo de forragem de capim-elefante manejado sob pastejo rotativo, com período de ocupação dos piquetes de três dias e variação do intervalo de pastejo de: 30 dias (com e sem o uso de concentrado ao longo do ano) e 36 e 45 dias (sem o uso de concentrado). Foram usadas 24 vacas Holandês × Zebu em lactação. De fevereiro a maio o pasto foi o único volumoso. De junho a setembro, as vacas receberam cana mais 1% de uréia. A composição química de extrusas de capim-elefante foi, de modo geral, semelhante (P>0,05) entre intervalos de pastejo (6,1 a 18,2% para PB; 63,5 a 81,4% para FDN; 32,7 a 47,6% para FDA e 43,7 a 72,9% para digestibilidade in vitro da MS). Houve decréscimo no teor de PB do capim-elefante e aumento nos de FDN e FDA para cada dia adicional de ocupação do piquete (P0,05) nos diferentes intervalos de pastejo, variando de 1,7 a 3,6%PV para MS e de 1,1 a 2,7%PV para FDN. Na estação seca, nas pastagens sem concentrado, o consumo de MS do capim-elefante variou de 0,39 a 2,2%PV e sua contribuição no consumo total da dieta decresceu de 52% no primeiro para 43% no terceiro dia de ocupação do piquete. O consumo suplementar de cana mais uréia foi efetivo em minimizar a redução no consumo total de MS.

Mean daily dry matter intake of elephantgrass (DMI) (Pennisetum purpureum, Schumack) in a rotational grazing with lactating Holstein × Zebu cows was estimated in a trial carried out from February to September. The pasture was divided into paddocks and grazed for three days by 24 cows randomly allotted to four treatments. The treatments consisted on grazing intervals of 30 days, and concentrate (2kg/cow/day) and grazing intervals of 30, 36 or 45 days without concentrate. From February to May the elephantgrass was the only roughage, but from June to September (dry season) the cows were fed on chopped sugarcane plus 1% urea. DMI was estimated monthly using the extrusa in vitro dry matter digestibility (IVDMD) and the fecal output (chromium oxide). The average chemical composition of extrusa was generally similar (P>.05) among grazing intervals (6.1 to 18.2% of CP; 63.5 to 81.4% of NDF; 32.7 to 47.6% of ADF and 43.7 to 72.9% of IVDMD). The CP content of extrusas decreased and the NDF and ADF contents increased (P.05) among grazing intervals. During the dry season cows fed on treatments without concentrate the DMI varied from .39 to 2.2%BW and its contribution to total DM intake decresead from 52% in the first to 43% in the third day of paddock occupation. Sugarcane intake effectively minimized the effects of the low pasture intake in the dry season.

Relação entre variáveis na regulação do consumo de vacas Holandês x Zebu em lactação sob pastejo em capim-elefante / Relationship between variables concerning elephantgrass (Pennisetum purpureum, Schum. ) dry matter intake by grazing Holstein x Zebu lactating cows

A análise fatorial de componentes principais (CP) foi usada no exame do relacionamento entre variáveis de um banco de dados da Embrapa Gado de Leite. As variáveis disponíveis foram relacionadas às vacas (dias em lactação, teores lácteos de gordura e extrato seco total, produção de leite, ordem de lactação, peso vivo e grau de sangue), ao manejo (dia de pastejo, disponibilidade e períodos de descanso da pastagem), ao ambiente (estação do ano, precipitação pluviométrica) e ao alimento (consumo de nutrientes do concentrado e da cana x uréia, consumo de MS de pastagem de capim-elefante, composição química e digestibilidade in vitro da pastagem e concentração fecal de PB, FDN e FDA). O primeiro CP (33,7 por cento da inércia dos dados) representou o uso da suplementação volumosa (cana x uréia) da pastagem em resposta à redução sazonal da disponibilidade e do consumo de capim-elefante. O segundo CP (15,3 por cento da inércia) foi relacionado ao consumo de nutrientes do concentrado. O terceiro CP (8,5 por cento da inércia) representou efeitos do manejo sobre a composição química da pastagem. A interpretação gráfica dos resultados favoreceu a percepção mais dinâmica da intensidade da associação e do antagonismo entre as variáveis contextualizadas no estudo.

Comparação entre métodos de estocagem de DNA extraído de amostras de sangue, sêmen e pêlos e entre técnicas de extração / Comparison between storage methods of DNA extracted from blood, semen and hair and between the techniques of extraction

DNA samples of six bovines obtained from three tissues (blood, semen and hair) were extracted using two different techniques. After the extraction procedures the samples were divided in six fractions. Three were stored at -20º C and three at 4º C. Every three months one sample of each tissue/extraction procedure was analyzed in spectrophotometer, to determine the quantity of the DNA and the extract was amplified using the primer RM 29. No differences in the DNA quantity or in the level of protein contamination among the three periods of analyses were observed. All the DNA extracted by quick extraction technique showed good amplification patterns during the nine months, meaning that this technique can be used in laboratory routine instead of the permanent extraction technique. The extract obtained from blood, using the permanent extraction technique, showed the higher quantity of DNA with the smaller index of protein contamination. The high quantity of protein contamination found in the semen samples preserved in egg yolk demanded modifications in both extraction techniques. After that the results were positive, showing good amplification patterns.

Degradação ruminal in situ do capim-elefante (Pennisetum purpureum, Schumack) consumido sob pastejo por vacas mestiças Holandês x Zebu em lactação / Rumen degradability of elephantgrass (Pennisetum purpureum, Schumack) grazed by lactating crossbred Holstein x Zebu dairy cows

Dois experimentos foram conduzidos em pastagem de capim-elefante manejada em sistema rotativo. Foram utilizadas duas repetições de área por tratamento e três dias de ocupação do piquete. No primeiro experimento (estação da seca) foram usadas 18 vacas Holandês I Zebu em lactação, sendo seis fistuladas no rúmen. Foram estudados período de descanso da pastagem de 30 dias, sem uso de concentrado, e períodos de descanso de 30 e 45 dias, com uso de concentrado. Entre ordenhas, as vacas receberam cana-de-açúcar com 1 por cento de uréia:sulfato de amônio (9:1). Amostras de extrusas (três dias de pastejo I duas repetições de área de pastagem) foram incubadas no rúmen das vacas fistuladas. No segundo experimento (estação das chuvas) foram usadas 12 vacas em lactação (quatro fistuladas no rúmen) e similar procedimento para estudo de dois períodos de descanso da pastagem (30 ou 45 dias) sem suplementação. A partir do primeiro dia de ocupação do piquete houve diminuição na qualidade da forragem selecionada. Na seca foi observada menor degradabilidade efetiva (DE) no terceiro dia de ocupação do piquete. No período das chuvas a DE foi semelhante nos três dias de ocupação do piquete. Maior DE e melhor qualidade da forragem foram verificadas para períodos de 30 dias de descanso da pastagem

Modelagem comparativa da cinética de fluxo da fase sólida do capim-elefante (Pennisetum purpureum, Schumack) consumido sob pastejo por vacas mestiças Holandês x Zebu em lactação / Evaluation of mathematical models to estimate the passage rate of solids in Holstein x Zebu lactating cows grazing on elephantgrass (Pennisetum purpureum, Schumack)

Dois experimentos foram conduzidos em pastagem de capim-elefante manejada em sistema rotativo. Foram usadas duas repetições de área por tratamento e o período de ocupação dos piquetes foi de três dias. No primeiro experimento (estação da seca) foram usadas 18 vacas Holandês x Zebu em lactação, sendo seis fistuladas no rúmen e alocadas em cada repetição de área de cada um dos três tratamentos: período de descanso da pastagem de 30 dias, sem uso de concentrado, e períodos de descanso de 30 e 45 dias, com uso de concentrado. Entre ordenhas, as vacas receberam cana-de-açúcar com 1 por cento de uréia:sulfato de amônio (9:1). Em cada vaca fistulada, em função do tratamento, foi administrada FDN-cromo-mordente de extrusas de capim-elefante obtidas em cada dia de ocupação do piquete. No segundo experimento (estação das chuvas) foram usadas 12 vacas em lactação (quatro fistuladas no rúmen) e estudaram-se dois períodos de descanso da pastagem (30 e 45 dias) sem suplementação. As estimativas da taxa de passagem ruminal obtidas de dois modelos (bicompartimental tempo-independente e multicompartimental tempo-dependente) foram bastante próximas. Valores superiores para taxa de passagem pós-ruminal foram observados para o modelo multicompartimental tempo-dependente. Na estação da seca, os valores médios para taxas de passagem ruminal e pós-ruminal foram, respectivamente, 0,042 e 0,087/h (modelo bicompartimental tempo-independente) e 0,041 e 0,109/h (modelo multicompartimental tempo-dependente). Na estação das chuvas observaram-se valores de 0,035 e 0,056/h, e de 0,029 e 0,090/h, na mesma ordem de citação